SLRI | BL4.1 | BEAMLINE SPECIFICATION | ACCESSORIES | SAMPLE PREPARATION | DATA ANALYSIS | PUBLICATIONS | RESEARCH HIGHLIGHT | USEFUL LINKS | CONTACT US

NEW WEBSITE

การเตรียมตัวอย่างให้เหมาะสมต่อการนำมาวิเคราะห์ด้วย SR-FTIR microspectroscopy

โหมดการวัดแบบส่องผ่าน (Transmission mode)

การวัดตัวอย่างในโหมดการส่องผ่าน (transmission) นั้นจะให้คุณภาพของสเปกตรัมที่ดีกว่าการวัดในโหมดการสะท้อนกลับ (reflection)  โดยจะใช้ objective กำลังขยายที่ 15X หรือ 36X ในการวิเคราะห์ ทั้งนี้ ขึ้นกับขนาดของตัวอย่าง

การเตรียมตัวอย่างเพื่อนำมาวิเคราะห์

ตัวอย่างเนื้อเยื่อ

การเตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อสำหรับนำมาวิเคราะห์ในโหมดการส่องผ่าน ตัวอย่างจะต้องถูกตัดให้บาง (5-7 ไมโครเมตร ขึ้นอยู่กับชนิดของตัวอย่าง) โดยตัวอย่างเนื้อเยื่อที่ถูก fix ด้วย OCT (Optimum cutting temperature) จะถูกตัดภายใต้อุณหภูมิติดลบด้วยเครื่อง cryomicrotome ตัวอย่างที่ถูกตัดเป็นชิ้นบางจะถูกวางลงบนแผ่น IR transparent window (BaF2/CaF2/ZnS/ZnSe) และเก็บไว้ใน desiccator อย่างน้อย 1 วันก่อนนำมาวิเคราะห์

สำหรับตัวอย่างที่ถูก fix ด้วยพาราฟิน ตัวอย่างเนื้อเยื่อจะถูกนำไปตัวด้วยเครื่อง microtome ภายใต้อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างที่ถูกตัดเป็นชิ้นบางจะถูกวางลงบนแผ่น IR transparent window (BaF2/CaF2/ZnS/ZnSe) จากนั้นต้องล้างเอาพาราฟินที่อยู่ในตัวอย่างออกด้วย xylene ก่อนนำมาวิเคราะห์ เนื่องจากจะปรากฏพีคของพาราฟินรบกวนที่ตำแหน่ง CH stretching vibration (3000-2800 cm^-1) and CH₂, CH₃ bending (1460 and 1380 cm^-1).

ตัวอย่างเซลล์จุลินทรีย์

สำหรับตัวอย่างเซลล์จุลินทรีย์ที่เลี้ยงในอาหารเหลว สามารถล้างเซลล์ด้วยน้ำเกลือ 0.85% อย่างน้อย 2 ครั้ง เพื่อล้างเอาอาหารเลี้ยงเชื้อออก จากนั้นปั่นล้างด้วยน้ำกลั่นนึ่งฆ่าเชื้ออย่างน้อย 2 รอบเพื่อล้างผลึกเกลือออก จากนั้น resespend เซลล์จุลินทรีย์ในน้ำกลั่นนึ่งฆ่าเชื้อและปรับให้มีความเข้มข้นที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ หยดตัวอย่างลงบน IR transparent window (BaF2/CaF2/ZnS/ZnSe) และเก็บไว้ใน desiccator อย่างน้อย 1 วันก่อนนำมาวิเคราะห์

ตัวอย่างเซลล์ (Cell line)

ตัวอย่างเซลล์ควรถูกเลี้ยงบน IR transparent window (BaF2/CaF2/ZnS/ZnSe) จากนั้นจึงล้างด้วยน้ำเกลือ 0.85-0.9% เพื่อเอาอาหารออกและป้องกันเซลล์แตก และล้างด้วยน้ำกลั่นนึ่งฆ่าเชื้ออย่างรวดเร็ว แล้วจึงทำให้แห้งอย่างรวดเร็วและเพื่อให้ผิวหน้าตัวอย่างเรียบเป็น smooth layer โดยการนำไปวางใน vacuum desiccator โดยลักษณะเซลล์บน window ไม่ควรทับกันจนหนาหรือกระจายบางเกินไป

ตัวอย่างแห้งหรือผง

สำหรับการวัดตัวอย่างแห้งหรือผง ที่มีปริมาณน้อยมากหรือมีรูปร่างไม่แน่นอน  สามารถทำได้โดยใช้ที่ใส่ตัวอย่างคือ diamond compression โดยจะวางตัวอย่างลงบนแผ่น diamond จากนั้นกดปิดให้ตัวอย่างถูกบีบให้บางและแสงผ่านได้ โดยตัวอย่างที่นิยมนำมาใช้วิเคราะห์ เช่น ฟอสซิล ตัวอย่างทางโบราณคดี หลักฐานทางนิติวิทยา เป็นต้น 

โหมดการวัดแบบสะท้อนกลับ (Reflection mode)

การวัดตัวอย่างในโหมดสะท้อนกลับนั้น จะมี 2 ลักษณะ ได้แก่ (1) การวัดโดยใช้ IR objective ขนาด 15X หรือ 36X วัดตัวอย่างที่ถูกเตรียมบน reflective sunstrate (MIIR slide/Si wafer/Au coated slide) แทนการเตรียมตัวอย่างบน IR transparent window โดยการเตรียมตัวอย่างจะขึ้นกับชนิดของตัวอย่างเช่นเดียวกับการวัดในโหมดส่องผ่าน หรือ (2) การวัดโดยใช้ 20X ATR objective กดลงเพื่อให้สัมผัสกับตัวอย่าง โดยสามารถใช้ในการถ่ายภาพและการวัดตัวอย่างในโหมดสะท้อนกลับได้ โดยขณะวัดตัวอย่าง หัว ATR crystal จะมีการสัมผัสกับตัวอย่าง ซึ่งลักษณะตัวอย่างที่นำมาวิเคราะห์ในโหมดนี้ เช่น ตัวอย่าง thin film, polymer, เส้นผม หรือตัวอย่างเซรามิก เป็นต้น 

หากท่านมีข้อสงสัยเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่างสามารถติดต่อ This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it. หรือโทร 044-217040 ต่อ 1481

 SLRI | BL4.1 | BEAMLINE SPECIFICATION | ACCESSORIES | SAMPLE PREPARATION | DATA ANALYSIS | PUBLICATIONS | RESEARCH HIGHLIGHT | USEFUL LINKS | CONTACT US

NEW WEBSITE