ดูผลงานเด่นทั้งหมด
การใช้เทคนิค Synchrotronradiation Fourier transform infrared (FTIR) microspectroscopy ในการจำแนกและติดตามคุณภาพของเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมารูปแบบสามมิติ
ธราพงษ์ ศรีสงคราม
บัณฑิตศึกษาสาขาวิจัยและพัฒนาเภสัชภัณฑ์ คณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น
รศ. ดร. นาถธิดา วีระปรียากูร
ภาควิชาเภสัชเคมี คณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยขอนแก่น
ดร.กาญจนา ธรรมนู
สถาบันวิจัยแสงซินโครตรอน (องค์การมหาชน)
ปัจจุบันการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อการวิจัยและพัฒนายาสำหรับผู้ป่วยมะเร็งส่วนใหญ่จะเพาะเลี้ยงเซลล์ในรูปแบบสองมิติ (adherent cell model) ที่เซลล์จะเกาะติดกับภาชนะหนึ่งด้าน ส่วนอีกหนึ่งด้านจะสัมผัสกับอาหารเลี้ยงเซลล์ ทว่ารูปแบบเซลล์ดังกล่าวไม่สะท้อนถึงการจัดเรียงตัวตามธรรมชาติและไม่ตรงกับพยาธิสภาพของเซลล์มะเร็งในร่างกาย ดังนั้นการเพาะเลี้ยงเซลล์สามมิติ (three dimensional cell culture)จึงถูกพัฒนาขึ้นเพื่อให้ได้รูปแบบเซลล์ที่มีความสอดคล้องกับสรีรวิทยาและพยาธิสภาพของโรคโดยเฉพาะมากกว่ารูปแบบเซลล์สองมิติ รูปแบบเซลล์สามมิติจะมีสภาพการกระจายตัว (celldistribution) อันตรกิริยาระหว่างเซลล์ (cell to cell interaction) ที่สอดคล้องกับสรีรวิทยาและพยาธิสภาพของโรคมะเร็ง (tumor physiology) ที่เซลล์มะเร็งมักจะจับกลุ่มเป็นก้อนอยู่ภายในชั้นเนื้อเยื่อมากกว่าการเติบโตเป็นชั้นเดียว (monolayer) และมีรูปแบบการได้รับอาหารเลี้ยงเชื้อต่างจากแบบสองมิติ (รูปที่ 1) อย่างไรก็ตามการเพาะเลี้ยงเซลล์สามมิติยังมีข้อจำกัดบางส่วน เช่น ความไม่แม่นยำของโมเดลในการเตรียมแต่ละครั้ง อาทิ อาจเกิดความแปรปรวนของลักษณะกายภาพ ลักษณะสัณฐานวิทยาของเซลล์ และองค์ประกอบภายในเซลล์ ซึ่งเปลี่ยนแปลงตามขนาดและรูปร่างของเซลล์รูปแบบสามมิติที่สร้างได้แต่ละครั้ง
(ก)
(ข)
เซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิด (ก) สองมิติ (2D) และ (ข) สามมิติ (3D)
จากการศึกษาได้มุ่งเป้าไปที่การนำเทคนิค Synchrotron radiation FTIR microspectroscopy, SR-microFTIR) ที่มีต้นกำเนิดพลังงานจากแสงซินโครตรอนมาใช้ตรวจสอบ ติดตามคุณภาพของเซลล์รูปแบบสามมิติที่เตรียมขึ้น เพื่อใช้เป็นแบบจำลองสำหรับการวิจัยและพัฒนาทางคลินิก โดยเทคนิคดังกล่าวมีข้อดีคือ มีศักยภาพสูงในการติดตามการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นภายในเซลล์ สามารถลดเวลาการเตรียมตัวอย่างและลดค่าใช้จ่ายในการวัดตัวอย่างแต่ละครั้งเมื่อเทียบกับเทคนิคอื่น เช่น เทคนิคการวัดปริมาณการแสดงออกของยีน (gene expression) ดังนั้นการนำเทคนิค SR-microFTIRมาวิเคราะห์ตรวจสอบคุณภาพของเซลล์สามมิติ จึงนำไปสู่ข้อมูลที่เป็นองค์ความรู้ใหม่และสามารถนำไปประยุกต์ใช้สำหรับงานวิจัยและการทดสอบทางคลินิกได้มากขึ้น
โดยผู้วิจัยนำมะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา (malignant melanoma) ซึ่งเป็นมะเร็งที่มีลักษณะความผิดปกติทางพันธุกรรมที่ซับซ้อน มีอุบัติการณ์การตายสูงเมื่อเปรียบเทียบกับมะเร็งผิวหนังชนิดอื่นมาเป็นเซลล์ตัวอย่างในการวิจัย พบว่าการดูดกลืนแสงของเซลล์มะเร็งชนิดเมลาโนมารูปแบบสองมิติและสามมิติ มีค่าการดูดกลืนแสง FTIR ที่แตกต่างกัน (รูปที่ 2ก) โดยเซลล์ชนิดสามมิติมีปริมาณของไขมันและกรดนิวคลีอิกลดลงเมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์รูปแบบสองมิติ และโครงสร้างของโปรตีนในเซลล์สามมิติต่างจากเซลล์สองมิติ (รูปที่ 3) ซึ่งผลดังกล่าวสอดคล้องกับการทำงานของโปรตีนภายในเซลล์ และโดยเทคนิค SR-microFTIRสามารถติดตามการเปลี่ยนแปลงขององค์ประกอบภายในเซลล์สามมิติที่มีขนาดและความหนาแน่นของเซลล์แตกต่างกันได้ จากการจำแนกความแตกต่างของการดูดกลืนแสง FTIR (รูปที่ 2ข) โดยพบว่าความหนาแน่นของเซลล์ที่เพิ่มขึ้นสัมพันธ์กับการเพิ่มขึ้นของปริมาณกรดไขมัน (fatty acid) และการเพิ่มขึ้นของปริมาณกรดนิวคลีอิก (nucleic acid) จากผลที่พบนี้นำไปสู่การประยุกต์ใช้เทคนิค SR-microFTIRสร้างดัชนีวัดทางชีวภาพ (biomarker)เพื่อวัดและติดตามคุณภาพของเซลล์ชนิดสามมิติต่อไปในอนาคต ทั้งนี้ผลการศึกษานี้เป็นข้อมูลส่วนหนึ่งของผลงานที่วิเคราะห์ตัวอย่างเซลล์ด้วยเทคนิค SR-microFTIRซึ่งผลงานวิจัยฉบับสมบูรณ์จะมีการตีพิมพ์เผยแพร่ต่อไป
(ก)
(ข)
การดูดกลืนแสง FTIR ของเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิดสองมิติ (2D) และ สามมิติ (3D) โดย
(ก) เปรียบเทียบระหว่างรูปแบบ 2D และ 3D และ (ข) เปรียบเทียบรูปแบบ 3D ที่เซลล์มีความหนาแน่นของเซลล์ต่างกันระหว่าง 5000 ถึง 20000 เซลล์
(ก)
(ข)
การแสดงตำแหน่งและค่าการดูดกลืนแสงของโครงสร้างโปรตีนชนิดทุติยภูมิ (secondary proteinstructure) ของเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิด (ก) สองมิติ (2D) และ (ข) สามมิติ (3D)
สารจากประธานกรรมการและสารจากผู้อำนวยการ
ประวัติความเป็นมา
คณะกรรมการและคณะผู้บริหาร
รางวัลแห่งความภาคภูมิใจ
โครงการ 3 GeV
การพัฒนาและการดำเนินงาน
การพัฒนาและการเดินเครื่องกำเนิดแสงซินโครตรอน
การพัฒนาระบบลำเลียงแสงและสถานีทดลอง
การดำเนินงานด้านเทคนิคและวิศวกรรม
การดำเนินงานด้านความปลอดภัย
สถิติการให้บริการ
การให้บริการแสงซินโครตรอน และการถ่ายทอดเทคโนโลยี แก่ภาคอุตสาหกรรม
มูลค่าเพิ่มทางเศรษฐกิจ
ผลงานวิจัยเด่น
พนักงานดีเด่น
ผลงานดีเด่น
กิจกรรมเด่น
สารจากประธานกรรมการและสารจาก
ผู้อำนวยการ
ประวัติความเป็นมา
คณะกรรมการและคณะผู้บริหาร
รางวัลแห่งความภาคภูมิใจ
โครงการ 3 GeV
การพัฒนาและการดำเนินงาน
การพัฒนาและการเดินเครื่องกำเนิด
แสงซินโครตรอน
การพัฒนาระบบลำเลียงแสงและ
สถานีทดลอง
การดำเนินงานด้านเทคนิคและ
วิศวกรรม
การดำเนินงานด้านความปลอดภัย
สถิติการให้บริการ
การให้บริการแสงซินโครตรอน และการถ่ายทอดเทคโนโลยี แก่ภาคอุตสาหกรรม
มูลค่าเพิ่มทางเศรษฐกิจ
ผลงานวิจัยเด่น
พนักงานดีเด่น
ผลงานดีเด่น
กิจกรรมเด่น
การเผยแพร่ผลงานวิจัย